چکیده:
زمینه مطالعه: لپتین که پروتئین حاصل از بیان ژن چاقی است به عنوان یک آدیپوکاین حاوی پیام در تنظیم اخذ غذا، متابولیسم انرژی و فعالیت های تولیدمثلی پستانداران عمل می کند. اثرات تولیدمثلی لپتین در سطوح مختلف محور هیپوتالاموس- هیپوفیز-گناد مورد تایید قرار گرفته است. همچنین، اثر مستقیم و موضعی لپتین در بلوغ اووسیت و جسم زرد گاو مشخص شده است. هدف: با توجه به تفاوت های احتمالی بین گونه ای این مطالعه به منظور بررسی بیان رونوشت (mRNA) لپتین و گیرنده عملکردی آن در جسم زرد گوسفند طراحی گردید. روش کار: تخمدان های حاوی جسم زرد از گوسفندان بالغ کشتار شده در فصل تولیدمثلی جمع آوری گردید. RNA تام از نمونه های جسم زرد استخراج شد و سنتز cDNA انجام گرفت. در ادامه، واکنش زنجیره ای پلیمراز با استفاداه از پرایمرهای اختصاصی هر ژن انجام شد. بتا اکتین به عنوان یک ژن خانه دار برای تایید صحت واکنش ها استفاده شد و بافت چربی نیز به عنوان نمونه کنترل مثبت برای بیان لپیتین و گیرنده آن مورد استفاده قرار گرفت. نتایج: الکتروفورز محصولات واکنش زنجیره ای پلیمراز نشان داد که قطعات موردانتظار یعنی قطعه 162 جفت بازی لپیین و قطعه 121 جفت بازی گیرنده آن تکثیر شده اند. علاوه بر این، تعیین توالی قطعات به دست آمده تایید کننده نتیجه اولیه بود. نتیجه گیری نهایی: یافته های ما بیان رونوشت لپتین و گیرنده آن در جسم زرد گوسفند را تایید کرد. این یافته می تواند مبنایی برای انجام مطالعات بعدی جهت بررسی اثرات مستقیم لپتین بر روی جسم زرد گوسفند باشد.
چکیده انگلیسی:
Background: Leptin, the product of the obesity (ob) gene, acts as a signaling adipokine for modulating food intake, energy metabolism and reproductive functions in mammals. Leptin’s effects on the reproductive system at various levels of the hypothalamic-pituitary-gonadal axis have been established. Moreover, the direct and local effect of leptin on bovine oocyte maturation and corpus luteum function has been determined. Objectives: Due to species differences, this study was designed to investigate expression of leptin mRNA as well as its long isoform receptor (Ob-Rb) mRNA in sheep corpus luteum. Methods: Ovaries of sheep containing mature corpus luteum were collected in the reproductive season from abattoirs. Total RNA of corpus luteum was extracted, cDNA synthesis was carried out subsequently and PCR reaction was performed using primers which were designed specifically for each gene. Beta-actin was used as housekeeping gene to verify reactions, and adipose tissue was selected as positive sample for expression of leptin and leptin receptor. Results: Gel electrophoresis of PCR products showed the amplification of 162 and 121-bp amplicons in all samples for leptin and leptin receptor respectively. Moreover, sequencing the amplified fragments and blasting them confirmed the accuracy of results. Conclusion: Our findings confirm the expression of leptin and its functional receptor transcripts in ovine corpus luteum. More studies for determining leptin effects on corpus luteum are guaranteed.
خبرنامه
برای ثبت نام در خبرنامه و دریافت خبرنامه ایمیل خود را وارد نمایید.