چکیده:
در بالغین، سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی (SSCs) تنها سلول‌های بنیادی هستند که قادر به انتقال اطلاعات ژنتیکی به نسل بعد می‌‌باشند. با در نظر گرفتن این که یک SSC منفرد می‌تواند به تعداد زیادی از اسپرماتوزوآ تبدیل شود، دستکاری ژنتیکی این سلول‌ها، یک تکنولوژی نوین با کاربردهای عملی در گونه‌های مختلف حیوانی را مهیا می‌سازد. در این مطالعه ارزیابی انتقال ژنEnhanced Green Fluorescent Protein (EGFP) به کلونی‌های اسپرماتوگونی گاوی از طریق حامل لیپوفکتامین می‌باشد. کارایی انتقال ژن خارجی EGFP به SSCs از طریق حامل لیپوفکتامین در سه روز از شروع کشت کلونی‌های اسپرماتوگونی (روز 4، 6 و 8) توسط میکروسکوپ فلورسنت ارزیابی شد. نتایج نشان داد که کلونی‌های ترانسفکت شده از طریق لیپوفکتامین در هر سه روز انجام ترانسفکشن در مقایسه با گروه‌های شاهد به طور معنی‌داری افزایش یافت (P<0.05). کلونی‌های ترانسفکت شده با لیپوفکتامین در مقایسه با گروه‌هایی که تنها حاوی ژن خارجی بدون حامل بودند نیز بالاتر بود (P<0.05). بیشترین میزان کلونی‌های ترانسفکت شده زمانی به دست آمد که ترانسفکشن در روز 4 کشت انجام شد. نتایج به دست آمده از این مطالعه پیشنهاد می‌کند که لیپوفکتامین می‌تواند به منظور انتقال مستقیم DNA خارجی به کلونی اسپرماتوگونی به ویژه در روز 4 کشت به صورت ایمن به کار رود.
چکیده انگلیسی:
Spermatogonial stem cells (SSCs) are the only stem cells in adults that can transfer genetic information to the future generations. Considering the fact that a single SSC gives rise to a vast number of spermatozoa, genetic manipulation of these cells is a potential novel technology with feasible application to various animal species. The aim of this study was to evaluate enhanced green fluorescent protein (EGFP) gene transfection into bovine SSCs via liposome carrier and assess the best incubation day in uptake exogenous gene by SSCs. Transfection efficiency of EGFP gene with lipofectamine 2000 was determined in days following each three day of transfection (day 4, 6 and 8 of the culture) by fluorescent microscope. Results showed that the transfected cells through lipofection increased significantly (P<0.05) in each three days of transfection in comparison with those of the control groups. The transfected SSCs were higher in comparison with those of the free exogenous gene carrier groups (P<0.05). In comparison with these three days, the rate of infected cells was higher when transfection proceeds at day four. It was concluded that lipofectamine can be used safely for direct loading exogenous DNA to SSCs particularly during the fourth day of culture.
خبرنامه
برای ثبت نام در خبرنامه و دریافت خبرنامه ایمیل خود را وارد نمایید.
