چکیده:
گرلین یک پپتید تحریک کنندهی هورمون رشد است که در طیور متشکل از 26 اسیدآمینه بوده و نقش مهمی در تعادل انرژی، چاقی و رفتار دریافت غذا ایفا میکند. این پپتید باعث افزایش اشتها و اکتساب وزن میشود. تحقیق حاضر به منظور شناسایی چندشکلی موجود در ناحیهی اینترون چهارم و اگزون پنجم ژن گرلین مرغان بومی استان خوزستان با استفاده از روش PCR-RFLP انجام شد. برای این منظور از تعداد 100 قطعه مرغ بومی ایستگاه تکثیر و اصلاح نژاد مرغ بومی نهادههای دامی جهاد استان خوزستان به صورت تصادفی خونگیری انجام شد. استخراج DNA از نمونهی خون با کمک روش نمکی انجام گرفت. سپس، برای تعیین کمیت و کیفیت DNA استخراجی از نانودراپ و ژل آگارز یک درصد استفاده شد. با استفاده از آغازگرهای اختصاصی، قطعهی 228 جفت بازی از ناحیهی اینترون چهارم و اگزون پنجم به کمک واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) تکثیر شد. در نهایت نمونههای تکثیر شده با کمک آنزیم HaeIII مورد هضم آنزیمی قرار گرفتند که پس از هضم قطعات 173 و 55 مشاهده شد. نتایج نشان داد که در تمامی نمونهها بعد از هضم آنزیمی، تنها یک شکل باندی وجود داشت. لذا با توجه به یکسان بودن ژنوتیپ نمونههای بررسی شده در این تحقیق هیچ جهشی مورد تأیید قرار نگرفت. عدم مشاهدهی چندشکلی احتمالاً میتواند به علت بسته بودن محیط پرورش و کوچک بودن تعداد نمونههای بررسی شده باشد.
چکیده انگلیسی:
Abstract
This study was performed in order to identify polymorphism in fourth intron and fifth exon in Khuzestan province native chicken’s ghrelin gene using PCR-RFLP method. Therefore, blood sampling from 100 chickens of Native chickens in Khuzestan province breeding and Jihad livestock inputs randomly was performed. DNA extraction from blood samples was performed using salt method. The quantity and quality of DNA was determined using gel electrophoresis (1%) and Nanodrop respectively and then 228 bp fragment of fourth intron and fifth exon region was amplified using polymerase chain reaction (PCR). Eventually amplified samples were digested with HaeIII enzyme and digest parts of 173 and 55 bp were found. The results showed that in all the samples after enzymatic digestion was only a same band shape therefore, considering the same genotype samples examined in this study, mutation was not founded. Not found polymorphism may be due to closed nurture environment and the low number of samples.
خبرنامه
برای ثبت نام در خبرنامه و دریافت خبرنامه ایمیل خود را وارد نمایید.